昆虫保幼激素(JH)ELISA试*盒实验原理:
本试*盒应用双抗体夹心法测定标*中昆虫保幼激素(JH)水平。用纯化的昆虫保幼激素(JH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入保幼激素(JH),再与HRP 标记的保幼激素(JH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的保幼激素(JH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中昆虫保幼激素(JH)浓度。
操作步骤:
1、准备试*,样品和标准品
2、加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟
3、洗板5次,加入酶标试*,37℃反应30分钟
4、洗板5次,加入显色A、B,37℃显色10分钟
5、加入终止液
6、15分钟之内读OD值后计算
试*盒计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
http://www.chem17.com/st382466/erlist_1672161.html
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